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《發(fā)酵茶及茶制品B族和G族黃曲霉毒素測(cè)定》征求意見

2022-01-21 08:50:11 來(lái)源：儀表網(wǎng) 閱讀量：9489

　　由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)牽頭制定的《發(fā)酵茶及茶制品B族和G族黃曲霉毒素測(cè)定》(項(xiàng)目計(jì)劃編號(hào)：2020-2-47)地方標(biāo)準(zhǔn)已完成征求意見稿，為進(jìn)一步完善標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容，按照《安徽省地方標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》(皖市監(jiān)發(fā)〔2019〕10號(hào))、《地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作指南》的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)公開征求意見。意見反饋郵箱：[email protected]，截止時(shí)間2022年2月10日前。
 
　　微生物菌群在發(fā)酵茶及含茶食品中普遍存在，正常的微生物菌群對(duì)發(fā)酵茶葉加工及品質(zhì)形成有重要作用。然而，在不良環(huán)境條件下，也容易造成有害霉菌污染，給發(fā)酵茶及含茶食品質(zhì)量安全帶來(lái)隱患。目前，全世界仍沒有針對(duì)于茶葉基質(zhì)的黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，不同檢測(cè)結(jié)果可比性小、爭(zhēng)議大。因此，制定茶葉基質(zhì)中的黃曲霉毒素檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法尤為重要。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了發(fā)酵茶葉及茶制品中黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2(以下簡(jiǎn)稱AFB1、AFB2、AFG1和AFG2)的測(cè)定方法。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)第一法為雙柱凈化-高效液相色譜柱后光化學(xué)衍生法，適用于發(fā)酵茶葉及茶制品中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2含量的測(cè)定。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)第二法為雙柱凈化-液相色譜柱串聯(lián)質(zhì)譜法，適用于發(fā)酵茶葉及茶制品中AFB1、AFB2、AFG1和AFG2含量的測(cè)定。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)章節(jié)由：范圍、規(guī)范性引用文件、方法原理、試劑材料、儀器設(shè)備、試驗(yàn)步驟、分析結(jié)果計(jì)算與表述、精密度及其他等部分組成。其中“試驗(yàn)步驟”和“結(jié)果和計(jì)算”是本標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)內(nèi)容。
 
　　方法原理：
 
　　試樣中的黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2，用乙腈-水溶液或甲醇-水溶液提取，提取液經(jīng)多功能凈化柱-免疫親和柱(MFC-IAC)凈化和富集，凈化液經(jīng)濃縮、定容和過(guò)濾后經(jīng)液相色譜分離，柱后光化學(xué)法衍生，經(jīng)熒光檢測(cè)器檢測(cè)。外標(biāo)法定量(HPLC-fld)。
 
　　儀器和設(shè)備：
 
　　1.高速粉碎機(jī)。2.超聲波/渦旋振蕩器或搖床。3.天平：感量0.01g和0.00001g。4.渦旋混合器。5.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速 ≥6000 r/min。6.玻璃纖維濾紙：快速、高載量、液體中顆粒保留1.6 μm。7.固相萃取裝置(配15-50 mL免疫親和層析針筒)。8.空氣壓力泵。9.氮吹儀。10.液相色譜儀：配熒光檢測(cè)器。11.液相色譜柱。12.光化學(xué)柱后衍生器(適用于黃曲霉毒素柱后衍生)。13.黃曲霉毒素多功能凈化柱或固體萃取柱(以下簡(jiǎn)稱MFC凈化柱)。14.免疫親和柱：AFB1 柱容量 ≥200 ng，AFB1柱回收率≥80%，AFG2的交叉反應(yīng)率≥80%(驗(yàn)證方法依據(jù)GB5009.22-2016)。15.針筒式濾器(100 mL規(guī)格)，可連接于空氣壓力泵。16.一次性針式過(guò)濾器：帶0.22 μm 微孔濾膜(所選用濾膜應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)溶液檢驗(yàn)，為有機(jī)相濾膜)。17.篩網(wǎng): 1 mm~2mm 試驗(yàn)篩孔徑。
 
　　樣品制備：
 
　　液體樣品(茶水及含茶飲料)
 
　　采樣量需大于500mL，對(duì)于袋裝、瓶裝等密封包裝樣品，需至少采集3個(gè)獨(dú)立包裝(同一批次或號(hào))，將所有液體樣品在一個(gè)容器中用混勻后，其中任意的100g(mL)樣品進(jìn)行檢測(cè)。
 
　　固體樣品(紅茶、黑茶、含茶食品)
 
　　采樣量需大于1.0kg，用高速粉碎機(jī)將其粉碎，過(guò)篩，使其粒徑小于2mm，混合均勻后，以四分法縮分至100g，儲(chǔ)存于樣品瓶中，密封保存，供檢測(cè)用。
 
　　樣品提取：
 
　　液體樣品(茶飲料)
 
　　取50 mL茶湯(精確至0.01 mL)，然后加入50mL乙腈(精確至0.01mL)、7.5g氯化鈉(精確至0.01g)，渦旋1 min，5000 r/min離心10 min，取上清，再加入50 mL乙腈重復(fù)提取，然后合并兩次上清，并加入2 g 氯化鈉(精確至0.01g)，2 g硫酸鎂(精確至0.01g)，5 g PVPP(精確至0.01g)，2gPSA(精確至0.01g)，5000 r/min離心10 min，取上清液備用。
 
　　固體樣品(紅茶、黑茶、含茶食品)
 
　　稱取5g試樣(精確至0.01g)于50mL離心管中，加入25mL乙腈-水溶液(84+16)或甲醇-水溶液(70+30)，渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min，將提取液全部轉(zhuǎn)移至針筒式濾器，真空抽濾全部提取液于離心管中，在6000 r/min下離心10 min(或玻璃纖維濾紙過(guò)濾)，取上清液備用。
 
　　定性檢測(cè)：
 
　　試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時(shí)間相比較，變化范圍應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。
 

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